RESUM I EXPLICACIÓN DE LA PROVA
La malària és una malaltia febril, hemolítica i transmesa per mosquits que infecta més de 200 milions de persones i mata més d'1 milió de persones a l'any.És causada per quatre espècies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale i P. malariae.Tots aquests plasmòdis infecten i destrueixen els eritròcits humans, produint calfreds, febre, anèmia i esplenomegàlia.P. falciparum causa una malaltia més greu que les altres espècies plasmodials i és responsable de la majoria de morts per malària.P. falciparum i P. vivax són els patògens més comuns, però hi ha una variació geogràfica considerable en la distribució de les espècies.
Tradicionalment, la malària es diagnostica mitjançant la demostració dels organismes sobre frotis gruixuts de sang perifèrica tenyits de Giemsa, i les diferents espècies de plasmodi es distingeixen per la seva aparició en eritròcits infectats.La tècnica és capaç de fer un diagnòstic precís i fiable, però només quan la realitzen microscopistes experts mitjançant protocols definits, la qual cosa presenta grans obstacles per a les zones remotes i pobres del món.
La prova ràpida de Malaria Pf/Pv Ag està desenvolupada per resoldre aquests obstacles.Utilitza anticossos específics de la proteïna II rica en histidina de P. falciparum (pHRP-II) i de la lactat deshidrogenasa de P. vivax (Pv-LDH) per detectar i diferenciar simultàniament la infecció per P. falciparum i P. vivax.La prova pot ser realitzada per personal no format o mínimament qualificat, sense equip de laboratori
PRINCIPI
La prova ràpida de malària Pf/Pv Ag és un immunoassaig cromatogràfic de flux lateral.Els components de la prova de tira consisteixen en: 1) un coixinet conjugat de color bordeus que conté anticossos anti-Pv-LDH de ratolí conjugat amb or col·loide (conjugats Pv-LDH-or) i anticossos anti-pHRP-II de ratolí conjugat amb or col·loide (conjugats pHRP-II-or), 2) una banda de prova de Pv-LDH i dues bandes de control (banda de prova de Pv-LDH i membrana P) banda).La banda Pv està recoberta prèviament amb un altre anticòs específic anti-Pv-LDH de ratolí per a la detecció d'infecció per Pv, la banda Pf està recoberta prèviament amb anticossos policlonals anti-pHRP-II per a la detecció de la infecció per Pf i la banda C està recoberta amb IgG anti-ratolí de cabra.
Durant l'assaig, es distribueix un volum adequat de la mostra de sang al pou de mostra (S) del casset de prova, s'afegeix un tampó de lisi al pou de tampó (B).El tampó conté un detergent que lisa els glòbuls vermells i allibera diversos antígens, que migren per acció capil·lar a través de la tira subjecta al casset.El Pv-LDH si està present a la mostra s'unirà als conjugats Pv-LDH-or.A continuació, l'immunocomplex és capturat a la membrana per l'anticòs anti-Pv-LDH prerevestit, formant una banda de Pv de color bordeus, que indica un resultat de la prova Pv positiu.Alternativament, el pHRP-II si està present a la mostra s'unirà als conjugats pHRP-II-or.A continuació, l'immunocomplex és capturat a la membrana pels anticossos anti-pHRP-II prerevestits, formant una banda de Pf de color bordeus, que indica un resultat de la prova Pf positiu.L'absència de cap banda de prova suggereix un resultat negatiu.La prova conté un control intern (banda C) que hauria de mostrar una banda de color bordeus de l'immunocomplex de conjugats IgG anti-ratolí de cabra / IgG de ratolí (anti-Pv-LDH i anti-pHRPII)-or independentment del desenvolupament del color en qualsevol de les bandes de prova.En cas contrari, el resultat de la prova no és vàlid i la mostra s'ha de tornar a provar amb un altre dispositiu.