RESUM I EXPLICACIÓN DE LA PROVA
La malària és una malaltia febril, hemolítica i transmesa per mosquits que infecta més de 200 milions de persones i mata més d'1 milió de persones a l'any.És causada per quatre espècies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale i P. malariae.Tots aquests plasmòdis infecten i destrueixen els eritròcits humans, produint calfreds, febre, anèmia i esplenomegàlia.P. falciparum causa una malaltia més greu que les altres espècies plasmodials i és responsable de la majoria de morts per malària.P. falciparum i P. vivax són els patògens més comuns, però hi ha una variació geogràfica considerable en la distribució de les espècies.
Tradicionalment, la malària es diagnostica mitjançant la demostració dels organismes sobre frotis gruixuts de sang perifèrica tenyits de Giemsa, i les diferents espècies de plasmodi es distingeixen per la seva aparició en eritròcits infectats1.La tècnica és capaç de fer un diagnòstic precís i fiable, però només quan la realitzen microscopistes experts mitjançant protocols definits2, la qual cosa presenta grans obstacles per a les zones remotes i pobres del món.
El kit de prova ràpida Malaria Pf / Pan Antigen està desenvolupat per resoldre aquests obstacles.La prova utilitza un parell d'anticossos monoclonals i policlonals contra la proteïna específica de P. falciparum, la Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) i un parell d'anticossos monoclonals contra la plasmodi Lactate Deshidrogenasa (pLDH), una proteïna produïda per les quatre espècies del plasmodi, permetent així la detecció i diferenciació simultània de les altres tres plasmodi inmodia.Pot ser realitzat per personal no format o mínimament qualificat, sense equip de laboratori.
PRINCIPI
El kit de prova ràpida Pf/ Pan Malaria és un immunoassaig cromatogràfic de flux lateral.Els components de la tira de prova consisteixen en: 1) un coixinet conjugat de color bordeus que conté anticossos anti-pLDH-II de ratolí conjugat amb or col·loide (conjugats pHRP II-or) i anticòs anti-pLDH de ratolí conjugat amb or col·loide (conjugats pLDH-or),
2) una tira de membrana de nitrocel·lulosa que conté dues bandes de prova (bandes Pan i Pv) i una banda de control (banda C).La banda Pan està recoberta prèviament d'anticossos monoclonals anti-pLDH pel qual es pot detectar la infecció amb qualsevol de les quatre espècies de plasmòdia, la banda Pf està recoberta prèviament d'anticossos policlonals anti-pHRP-II per a la detecció de la infecció per Pf i la banda C està recoberta amb IgG anti-ratolí de cabra.
Durant l'assaig, es distribueix un volum adequat de la mostra de sang al pou de mostra (S) del casset de prova, s'afegeix un tampó de lisi al pou de tampó (B).El tampó conté un detergent que lisa els glòbuls vermells i allibera diversos antígens de plasmodi, que migren per acció capil·lar a través de la tira subjecta al casset.El pHRP-II si està present a la mostra s'unirà als conjugats pHRP II-or.A continuació, l'immunocomplex és capturat a la membrana pels anticossos anti-pHRPII prerevestits, formant una banda de Pf de color bordeus, que indica un resultat de la prova Pf positiu.El pLDH si està present a la mostra s'unirà als conjugats d'or pLDH.A continuació, l'immunocomplex és capturat a la membrana per l'anticòs antipLDH prerevestit, formant una banda Pan de color bordeus, que indica un resultat positiu en la prova de plasmodi.En absència de la banda Pan, es pot recomanar un resultat positiu per a qualsevol dels altres tres plasmòdis.
L'absència de bandes de prova (Pan i Pf) suggereix un resultat negatiu.La prova conté un control intern (banda C) que hauria de mostrar una banda de color bordeus de l'immunocomplex d'IgG anti-ratolí de cabra / IgG de ratolí (conjugats pHRP-II i pLDH-or) independentment del desenvolupament del color en qualsevol de les bandes de prova.En cas contrari, el resultat de la prova no és vàlid i la mostra s'ha de tornar a provar amb un altre dispositiu.
