RESUM I EXPLICACIÓN DE LA PROVA
La leishmaniosi visceral, o Kala-azar, és una infecció disseminada causada per diverses subespècies de L. donovani.L'Organització Mundial de la Salut (OMS) estima que la malaltia afecta aproximadament 12 milions de persones en 88 països.Es transmet als humans per mossegades dels flebotòms, que adquireixen infecció per alimentar-se d'animals infectats.Tot i que és una malaltia que es troba als països pobres, al sud d'Europa, s'ha convertit en la principal infecció oportunista en pacients amb sida.La identificació de l'organisme L. donovani a partir de la sang, la medul·la òssia, el fetge, els ganglis limfàtics o la melsa proporciona un mitjà definitiu de diagnòstic.Detecció serològica d'anti-L.S'ha trobat que la IgM donovani és un excel·lent marcador de la leishmaniosi visceral aguda.Les proves utilitzades a la clínica inclouen ELISA, anticossos fluorescents o proves d'aglutinació directa 4-5.Recentment, la utilització de la proteïna específica de L. donovani a la prova ha millorat dràsticament la sensibilitat i l'especificitat.
La prova ràpida combinada de Leishmania IgG/IgM és una prova serològica basada en proteïnes recombinants, que detecta anticossos IgG i IgM contra L. Donovani simultàniament.La prova proporciona un resultat fiable en 15 minuts sense cap instrument.
PRINCIPI
La prova ràpida de Leishmania IgG/IgM és un immunoassaig cromatogràfic de flux lateral.El casset de prova consta de: 1) un coixinet conjugat de color bordeus que conté antigen recombinant de L. donovani conjugat amb or col·loide (conjugats de Leishmania) i conjugats IgG-or de conill, 2) una tira de membrana de nitrocel·lulosa que conté dues bandes de prova (bandes T1 i T2) i una banda de control (banda C).La banda T1 està recoberta prèviament amb IgM monoclonal anti-humana per a la detecció d'anti-L.La banda donovani IgM, T2 està recoberta prèviament amb reactius per a la detecció d'anti-L.donovani IgG, i la banda C està recoberta prèviament amb IgG anti conill de cabra.
Quan es distribueix un volum adequat de mostra de prova al pou de mostra del casset, la mostra migra per acció capil·lar a través del casset.La IgM de L. donovani si està present a l'exemplar s'unirà als conjugats de Leishmania.A continuació, l'immunocomplex és capturat a la membrana per l'anticòs anti-IgM humà prerevestit, formant una banda T1 de color bordeus, que indica un resultat positiu de la prova d'IgM de L. donovani.La IgG de L. donovani si està present a l'exemplar s'unirà als conjugats de Leishmania.A continuació, l'immunocomplex és capturat pels reactius prerevestits de la membrana, formant una banda T2 de color bordeus, que indica un resultat positiu de la prova d'IgG de L. donovani.
L'absència de bandes T (T1 i T2) suggereix un resultat negatiu.La prova conté un control intern (banda C) que hauria de mostrar una banda de color bordeus de l'immunocomplex del conjugat IgG anti conill de cabra/IgG-or de conill, independentment del desenvolupament del color en qualsevol de les bandes T.En cas contrari, el resultat de la prova no és vàlid i la mostra s'ha de tornar a provar amb un altre dispositiu.
