RESUM I EXPLICACIÓN DE LA PROVA
La filariosi limfàtica coneguda com a elefantiasi, causada principalment per W. bancrofti i B. malayi, afecta uns 120 milions de persones en 80 països.La malaltia es transmet als humans per les mossegades de mosquits infectats dins de les quals les microflaries xuclades d'un subjecte humà infectat es converteixen en larves de tercer estadi.En general, es requereix una exposició repetida i prolongada a les larves infectades per establir la infecció humana.
El diagnòstic parasitològic definitiu és la demostració de microflaries en mostres de sang.No obstant això, aquesta prova estàndard d'or està restringida pel requisit de recollida de sang nocturna i la manca de sensibilitat adequada.La detecció d'antígens circulants està disponible comercialment.La seva utilitat és limitada per a W. bancrofti.A més, la microfilarèmia i l'antigenèmia es desenvolupen de mesos a anys després de l'exposició.
La detecció d'anticossos proporciona un mitjà precoç per detectar la infecció per paràsits filarials.La presència d'IgM als antígens del paràsit suggereix una infecció actual, mentre que la IgG correspon a l'etapa tardana de la infecció o a la infecció passada.A més, la identificació d'antígens conservats permet que la prova "pan-filària" sigui aplicable.La utilització de proteïnes recombinants elimina la reacció creuada amb individus que tenen altres malalties parasitàries.
La prova ràpida combinada de filariosi IgG/IgM utilitza recombinant conservat
antígens per detectar simultàniament IgG i IgM als paràsits W. bancrofti i B. malayi sense la restricció de la recollida d'exemplars.
PRINCIPI
El kit de prova ràpida de filariosi IgG/IgM és un immunoassaig cromatogràfic de flux lateral.El casset de prova consta de: 1) un coixinet conjugat de color bordeus que conté antígens comuns recombinants de W. bancrofti i B. malayi conjugats amb or col·loide (conjugats de filariasi) i conjugats IgG-or de conill, 2) una tira de membrana de nitrocel·lulosa que conté dues bandes de prova C (banda M i G).La banda M està recoberta prèviament amb IgM monoclonal anti-humana per a la detecció d'IgM anti-W. bancrofti i B. malayi, la banda G està recoberta prèviament amb reactius per a la detecció d'IgG anti-W.bancrofti i B. malayi, i la banda C està recoberta prèviament amb IgG anti conill de cabra.
Quan es distribueix un volum adequat de mostra de prova al pou de mostra del casset, la mostra migra per acció capil·lar a través del casset.Els anticossos IgM de W. bancrofti o B. malayi si estan presents a la mostra s'uniran als conjugats de filariosi.A continuació, l'immunocomplex és capturat a la membrana per l'anticòs anti-IgM humà prerevestit, formant una banda M de color bordeus, que indica un resultat positiu de la prova d'IgM de W. bancrofti o B. malayi.
Els anticossos IgG de W. bancrofti o B. malayi si estan presents a l'espècimen s'uniran als conjugats de filariosi.A continuació, l'immunocomplex és capturat pels reactius prerevestits de la membrana, formant una banda G de color bordeus, que indica un resultat positiu de la prova d'IgG de W. bancrofti o B. malayi.
L'absència de bandes de prova (M i G) suggereix un resultat negatiu.La prova conté un control intern (banda C) que hauria de mostrar una banda de color bordeus de l'immunocomplex del conjugat IgG anti conill de cabra/IgG-or de conill, independentment del desenvolupament del color en qualsevol de les bandes de prova.En cas contrari, el resultat de la prova no és vàlid i la mostra s'ha de tornar a provar amb un altre dispositiu.